Come fare tampone con un pH-metro

Come fare tampone con un pH-metro


procedure di chimica e biochimica spesso cerniera sulle reazioni eseguite ad un pH specifico. Tali reazioni beneficiano l'uso di una soluzione tampone, che è un composto quantificata dalla sua resistenza alle variazioni di pH quando vengono aggiunti gli acidi o basi forti ad esso. L'esecuzione di queste procedure richiede una comprensione di miscelazione soluzioni tampone, così come la calibrazione e l'utilizzo di pH-metri.

istruzione

1 Seleziona sali soluzione tampone a pH corretto confini per la reazione. proteine ​​individuali e reazioni hanno requisiti specifici di pH. I requisiti sono esplicitamente indicati nel protocollo di reazione, presentato nella documentazione che accompagna la proteina / campione o registrate in tali volumi di riferimento come la Handbook of Chemistry and Physics. pH di una soluzione tampone ottimale deve scendere il più vicino possibile all'unità pH della reazione e non dovrebbe mai superare il valore più o meno 1 pH. sali soluzione tampone sono disponibili come pacchetto o possono essere miscelati dai componenti grezzi seguendo le ricette ampiamente disponibili.

2 Versare la soluzione tampone in un beaker da 1 litro. Aggiungere 1 litro di acqua distillata. Mettere una barra di agitazione nel bicchiere e posizionare il bicchiere su un piatto di agitazione. Attivare la piastra di agitazione a un basso di regolazione media. Mescolare fino a quando non cristalli di soluzione tampone rimangono visibili.

3 Mettere 100 ml coppa sotto l'ago di test del pH-metro. Pulire l'ago spruzzando con acqua distillata. Il bicchiere prenderà la corsa fuori. Calibrare il misuratore pH utilizzando le soluzioni di taratura. Pulire di nuovo l'ago. Smaltire i contenuti deflusso catturati nel bicchiere da 100 ml.

4 Portare il pH-metro alla piastra agitazione e beaker da 1 litro. Introdurre l'ago di test nella soluzione tampone. Premere il pulsante di calcolo del pH-metro per determinare il pH della soluzione. Se questo valore è troppo alto o basso, la soluzione richiede i seguenti passaggi aggiuntivi.

5 Mettere una punta micropipetta fresca sul micropipetter. Attivare la piastra di agitazione a bassa velocità. Se il pH è troppo alto, utilizzare il micropipetter per aggiungere una goccia alla volta di acido cloridrico alla soluzione. Lasciare la piastra agitazione per miscelare la soluzione e misurare il pH. Ripetere il processo fino a quando il pH della soluzione è il valore necessario. Se il pH è troppo basso, ripetere questo passaggio utilizzando idrossido di sodio al posto di acido cloridrico.

Consigli e avvertenze

  • Usare sempre attrezzature pulito per evitare l'introduzione di batteri o altri contaminanti nella vostra soluzione.
  • Reazioni spesso richiedono un pH precisa. Anche una leggera deviazione può risultare in un esperimento fallito.