Come fare una colorazione di Gram

Colorazione di Gram è una procedura comunemente usato in biologia e della medicina per aiutare a differenziare tra i batteri Gram-positivi e Gram-negativi. Ecco come fare una colorazione di Gram.

istruzione

1 Collocare un campione di una coltura batterica su un vetrino da microscopio. Un ciclo inoculo può essere utilizzato per trasferire i batteri alla slitta.

2 Utilizzare un bastone di legno per spalmare la coltura batterica sul vetrino da microscopio. Si desidera avere uno strato sottile, anche della cultura sulla diapositiva.

3 Asciugare la diapositiva contenente il coltura batterica. Ciò viene spesso fatto tenendo il vetrino su una piccola fiamma di un becco Bunsen.

4 Versare cristallo macchia viola su il campione batteriche sulla diapositiva. Sia il supporto scorrevole per circa 10 a 60 secondi, a seconda dello spessore dello striscio sul vetrino. Lavare la macchia di cristallo viola fuori della diapositiva con acqua.

5 Posizionare soluzione di iodio di Gram sul striscio batterico. Lasciare riposare lo striscio per altri 10 a 60 secondi a seconda dello spessore striscio. Risciacquare soluzione di iodio del grammo in più con più acqua.

6 Aggiungere qualche goccia di un decolorante per striscio batterico sulla diapositiva. Decolorizers che vengono spesso utilizzati sono o acetone o alcool. Risciacquare il decolorante fuori della diapositiva quando il decolorante non è colorato dalle macchie precedenti come decolorante cola della slitta. Un tempo tipico per questo è di circa 5 secondi.

7 Mettere un colorante di contrasto, come ad esempio la soluzione fucsina base o safranina, sul vetrino sul striscio batterico. Lasciare che il di contrasto di rimanere sul striscio per circa 40 a 60 secondi e poi risciacquare con acqua la di contrasto. Lasciare che il vetrino di aria secca.

8 Utilizzare un microscopio per esaminare la diapositiva contenente il striscio batterico. batteri Gram-positivi saranno color viola, e batteri Gram-negativi avranno un colore rosso o rosa.

Consigli e avvertenze

  • Seguire tutte le norme di sicurezza di laboratorio quando si lavora con soluzioni chimiche, batteri esemplari e il fuoco.